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硅膠基質固相萃取柱的操作步驟與注意事項

更新日期：2025-04-15 信息來源：本站瀏覽次數(shù)：487

　　硅膠基質固相萃取柱作為實驗室常用的樣品前處理工具，其正確操作直接影響分析結果的準確性。

　　一、操作步驟詳解

　　1、柱活化階段

　　使用前需用甲醇進行活化，隨后用同等體積水平衡。對于反相柱，建議采用含甲酸的水溶液平衡。控制活化流速，注意避免柱床干涸。

　　2、上樣環(huán)節(jié)

　　樣品溶液pH值應調節(jié)至目標物呈分子狀態(tài)。復雜基質樣品建議預先離心或過濾處理，保持流速。

　　3、淋洗優(yōu)化

　　選擇弱洗脫強度的溶劑去除干擾物。正相柱可采用正己烷-二氯甲烷混合液，反相柱推薦有機相水溶液。

　　4、洗脫控制

　　洗脫溶劑強度應比淋洗溶劑提高。常見組合：正相柱用乙酸乙酯-甲醇，反相柱用甲醇-乙腈。分兩次洗脫，收集洗脫液需氮吹濃縮。

　　二、關鍵注意事項

　　1、流速管理

　　全程保持穩(wěn)定流速，過快導致保留不足，過慢可能引起擴散。使用固相萃取裝置時注意壓力指示，超過時需檢查是否堵塞。

　　2、pH值調控

　　對于可電離化合物，需控制溶液pH使目標物保持中性。

　　3、溶劑兼容性

　　避免強極性溶劑直接上樣，可能導致填料塌陷。若樣品含高濃度有機相，需用水稀釋后再上樣。

　　4、儲存與維護

　　使用后立即用甲醇沖洗保存，冷藏可延長使用壽命。

　　三、異常處理方案

　　當回收率異常時，建議檢查：①活化是否充分；②樣品溶劑強度是否過高；③洗脫溶劑選擇是否恰當。常見問題可通過調節(jié)有機相比例或添加改性劑解決。

　　正確操作硅膠基質固相萃取柱可提高樣品凈化效果，建議每次使用前進行方法驗證，建立適合特定分析物的優(yōu)化方案。對于特殊基質樣品，可考慮增加預平衡步驟或使用混合型填料柱提高選擇性。