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共創(chuàng)共贏
參考《GBT 15038-2006 葡萄酒、果酒通用分析方法》
白藜蘆醇是葡萄酒中重要的功能性成分，具有抗癌、抗氧化、抗菌、抗過敏、抗血栓、抗高血脂、消炎、掃除自由基等多種藥理活性，受到國內外醫(yī)學界和葡萄酒研究者的廣泛關注。
國內外檢測白藜蘆醇含量的方法包括液相色譜法(HPLC)、氣質聯(lián)用法(GC-MS)、二次微分簡易示波伏安法、毛細管電泳法(CE)、紫外熒光法、薄層色譜法等。其中，液相色譜法選擇性強、靈敏度高、分離度好，是具有一定研究基礎與推廣意義的分析方法。國標方法《GB/T 15038-2006 葡萄酒、果酒通用分析方法》也有關于白藜蘆醇的檢測。由于不同紅酒中的白藜蘆醇含量具有很大的差異性，所以測定紅酒中白藜蘆醇含量可以為選擇葡萄品種、改進釀造工藝、判斷紅酒真?zhèn)渭百|量等等方面提供重要的參考。
迪馬科技建立固相萃取-液相色譜法檢測紅酒中白藜蘆醇，對比國標方法：
本方法無需樣品提取過程，直接過柱，操作簡便；
樣品調節(jié)pH后，使用ProElut BLC白藜蘆醇檢測固相萃取柱進行凈化，液相色譜法檢測；
方法定量限是1.0 mg/kg，優(yōu)于文獻方法2.0 mg/kg，回收率達85%以上，保證實驗結果的準確性、重現性；
適用于各省市出入境、質檢、疾控、食品藥品檢驗所、第三方檢測機構、食品檢測機構、大型食品生產商、高校和科研院所等。
ProElut BLC 柱填料由多種吸附劑按照一定的比例分層填裝而成，采用多種作用機理去除葡萄酒中酚類化合物，如黃酮、花色素、單寧等，適用于各類葡萄酒中白藜蘆醇的檢測；本產品是商品化的成品柱，吸附劑穩(wěn)定性好，不受外界環(huán)境因素影響，保證實驗結果的重現性和準確性；過柱過程中操作步驟簡單，有機溶劑用量少，減少對人體的危害同時提高工作效率。
以下為詳細解決方案，敬請參考！
1、適用范圍
本方案適用于葡萄酒中白藜蘆醇的檢測，方法檢出限是10.0 μg /L。
2、提取
取大約50 mL樣品于100 mL燒杯中，用氨水調節(jié)樣品pH至6.0，取出5 mL準備凈化。
3、凈化——ProElut BLC 6 mL（Cat.# 65918）
a活 化： | 依次加入5 mL甲醇、5 mL水，流出液棄去； |
b上 樣： | 加入待凈化液，流出液棄去； |
c淋 洗： | 加入5 mL 50%甲醇水，流出液棄去，推干小柱； |
d洗 脫： | 加入5 mL甲醇，收集流出液； |
e重新溶解： | 將流出液在55 ℃下氮吹至低于1 mL，用流動相定容至1 mL，供HPLC分析。 |
4、色譜條件
色譜柱：Diamonsil C18(2), 250 × 4.6 mm, 5 μm（Cat.# 99603）
流 速：1.0 mL/min
進樣量：20 μL
柱 溫：30 ℃
檢測器：UV 303 nm
流動相：乙腈：水=3：7
5、添加回收結果
葡萄酒中白藜蘆醇的HPLC檢測添加回收結果
基質 | 添加水平(mg/kg) | 回收率(%) |
張裕干紅葡萄酒 （窖藏2年） | 1.0 | 91.66 |
5.0 | 95.48 | |
經典王朝干紅葡萄酒 （窖藏） | 1.0 | 90.18 |
5.0 | 94.75 |
白藜蘆醇標準(5.0 mg/L)液相色譜圖
白藜蘆醇標準(25.0 mg/L)液相色譜圖
添加水平為1.0 mg//kg 張裕干紅葡萄酒中白藜蘆醇檢測的液相色譜圖
添加水平為5.0 mg//kg 張裕干紅葡萄酒中白藜蘆醇檢測的液相色譜圖
張裕干紅葡萄酒中白藜蘆醇檢測(空白樣品)的液相色譜圖
添加水平為1.0 mg//kg 經典王朝干紅葡萄酒中白藜蘆醇檢測的液相色譜圖
添加水平為5.0 mg//kg 經典王朝干紅葡萄酒中白藜蘆醇檢測的液相色譜圖
經典王朝干紅葡萄酒中白藜蘆醇檢測(空白樣品)的液相色譜圖
葡萄酒中白藜蘆醇的測定相關產品信息：
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
樣品前處理 | ||
65918 | ProElut BLC | 6 mL, 30/pk |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 | 12位 |
4803 | 1,3,6mL柱管通用連接器 | 15/pk |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正壓兩用泵，無油 | 1/pk |
99013 | 抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞) | 1/pk |
30039 | FitMax針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.22 μm 100/pk |
30040 | FitMax針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.45 μm 100/pk |
標準品 | ||
53-R5010-100MG | 白藜蘆醇[501-36-0] | 100 mg |
色譜柱及保護柱 | ||
99603 | 通用型反相液相色譜柱 Diamonsil C18(2) | 250 × 4.6 mm, 5 μm |
6201 | EasyGuard C18 保護柱 | 10 × 4.0 mm 1/pk 2個柱芯+1個柱套 |
HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑 | ||
50102 | 甲醇 HPLC級 | 4 L |
50101 | 乙腈 HPLC級 | 4 L |
通用色譜產品 | ||
52401B | 瓶架/藍色（現貨） | 50孔 |
52401A | 瓶架/白色（現貨） | 50孔 |
1034 | 樣品瓶（棕色/螺紋） | 2 mL, 100/pk |
1035 | 樣品瓶蓋/含墊（已經組裝） | 100/pk |
H80465 | HPLC 進樣針 | 25 μL |
紅色產品貨號#30039、#30040、#1034、#1035*
